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分離細(xì)胞時(shí)離心機(jī)轉(zhuǎn)子的操作
2009-5-20
1589
分離細(xì)胞的離心力常在(400~1000)g,轉(zhuǎn)速不高。因此,在降速過(guò)程中不能用制動(dòng)器,若使用制動(dòng),Coriolis力會(huì)產(chǎn)生渦旋效應(yīng),使離心過(guò)程中分離很好的區(qū)帶再次混合,或者使區(qū)帶變形、擴(kuò)寬。當(dāng)使用黏度低的介質(zhì)如Percoll、Iodixanol等,降速不穩(wěn)會(huì)造成嚴(yán)重影響。有些離心機(jī)有慢降速程序,使用它可有效提高梯度分辨率。很多細(xì)胞分離所要求的離心機(jī)轉(zhuǎn)速只有每分鐘幾十到幾百轉(zhuǎn),大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)在這一轉(zhuǎn)速范圍內(nèi)轉(zhuǎn)速不穩(wěn)定,有些離心機(jī)根本無(wú)法設(shè)定,可以采用增加梯度介質(zhì)密度的方法提...
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湘儀推出新款毛細(xì)管血液離心機(jī)
2009-5-18
1300
毛細(xì)管血液離心機(jī)可用于測(cè)定血液血細(xì)胞比積值,微量血液和微量溶液的分離。對(duì)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中臨床血液學(xué)與檢驗(yàn)具有重要作用。新款機(jī)型較之老款機(jī)型結(jié)構(gòu)大體一樣,除了及個(gè)別的外觀和控制面板具有重大改善,新款機(jī)型的外殼材質(zhì)不再采用笨重的資源的鋼板,而是采用高強(qiáng)度,耐沖擊,耐熱,耐化學(xué)腐蝕的工程塑料(engineering-plastics),外觀結(jié)構(gòu)弧度更加圓滑,顏色舒適,將實(shí)驗(yàn)室儀器的風(fēng)格表現(xiàn)的,觸摸面板采用分層結(jié)構(gòu),與老型號(hào)的機(jī)器相比更突顯出機(jī)器控制界面友好性和易操作性。新款機(jī)型的正式推出...
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細(xì)胞器的分離方法
2009-5-18
6050
實(shí)驗(yàn)室一般采用差速離心或密度梯度離心的方法得到分離細(xì)胞器。1.細(xì)胞膜的分離細(xì)胞膜又稱質(zhì)膜,分離細(xì)胞膜有助于研究生物膜的結(jié)構(gòu)與功能。一般說(shuō),紅細(xì)胞膜與線粒體膜的制備用差速離心法即可,其他細(xì)胞膜的分離可根據(jù)膜組分的密度大小不同,采用梯度離心后,分布于區(qū)域,可分離得到純制品。2.線粒體的分離線粒體普遍存在于真核細(xì)胞中,它是細(xì)胞呼吸的主要場(chǎng)所,細(xì)胞活動(dòng)所需能量主要依靠在線粒體內(nèi)進(jìn)行氧化所產(chǎn)生的能,線粒體的分離主要靠差速分離。3.線粒體膜分離線粒體膜分離方法主要是密度梯度離心。4.聚核...
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離心分離的應(yīng)用
2009-5-18
1530
根據(jù)顆粒在作勻速圓周運(yùn)動(dòng)時(shí)受到一個(gè)外向離心力的原理,發(fā)展了一種離心分離技術(shù)。這項(xiàng)技術(shù)應(yīng)用很廣,諸如分離出化學(xué)反應(yīng)后的沉淀物、天然的生物大分子、無(wú)機(jī)物、有機(jī)物,或者生物化學(xué)以及其他的生物學(xué)領(lǐng)域中常用來(lái)收集細(xì)胞、細(xì)胞器及大分子物質(zhì)。在國(guó)內(nèi)的蛋白質(zhì)制藥行業(yè),離心的根本目的是濃縮和分離,將固體從液體中分離,或者將不同密度的懸浮物、液相通過(guò)沉降速度的差異分離開(kāi)來(lái)。離心技術(shù)首先用于粗提收集菌體,其次是用于上柱前澄清,在藥物分析中可以用來(lái)檢定分子質(zhì)量、純度及篩選新的藥物。
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離心機(jī)分離實(shí)例一
2009-5-18
1515
豬腎中微粒體膜組分粗品的分離儀器與試劑1.超速離心機(jī)(冷凍離心機(jī))和轉(zhuǎn)頭2.勻漿緩沖液。50mmol/LHepes/NaOH(pH7.4),0.33mol/L蔗糖。3.重懸緩沖液。10mmol/LHepes/NaOH(pH7.4)。方法1.使用韋林?jǐn)嚢杵鳎ㄒ?℃預(yù)冷)在10倍體積(1L)的勻漿緩沖液(要求4℃預(yù)冷),中破碎100g豬腎皮質(zhì)。2.將勻漿物在離心機(jī)中于8000×g離心15min;3.小心地轉(zhuǎn)移出上清液,并將其在26000×g離心2min;4.用重懸緩沖液(要求4...
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分析超速離心機(jī)測(cè)定溶液大分子的沉降速度
2009-5-18
2037
分析超速離心機(jī)能用于測(cè)定溶液中大分子的沉降速度,這就是通常所說(shuō)的沉降速度法;或者在較低的離心轉(zhuǎn)速下離心一定時(shí)間后,是其在離心分析池中各個(gè)平面位置的樣品溶質(zhì)濃度不再有變化,建立起平衡狀態(tài),從而測(cè)定其大分子的分布,即所謂的沉降平衡法。其他一些沉降速度法和近似沉降平衡法等都是在次原理上派生出的。在速度沉降試驗(yàn)中,離心機(jī)轉(zhuǎn)速可用到60000r/min,甚至更高,依試樣分子量大小而定。